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水平显微注射法制备转基因小鼠的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 苗向阳;杨文胜;方昌阁

作者机构：

关键词： 小鼠;水平显微注射;转基因

期刊名称：中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2006 年 33 卷 12 期

页码： 58-60

摘要： 由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法。采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取鼠尾基因组DNA,PCR法筛选转基因阳性鼠。本试验采用Puc/BLG IN S和Chym os in基因,共使用710枚鼠原核胚进行研究,胚胎经注射后移植了25只受体,产下仔鼠77只;妊娠率分别为33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分别为9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),阳性率分别为4.88%(2/41)和8.33%(3/36)。将阳性雌鼠配种妊娠后,对外源基因整合情况进行检测,结果表明初步获得了转基因阳性小鼠。

分类号： Q789

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