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白屈菜CmTLP基因克隆及植物转化载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 赵露;苑雪琪;李俊;杨雪梅;魏云洁;许永华

作者机构：

关键词： 白屈菜;植物表达载体;抗寒机理;类甜蛋白

期刊名称：西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2020 年 9 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： [目的]克隆白屈菜CmTLP基因并进行植物表达载体构建,为进一步研究CmTLP基因的功能及探索耐寒抗寒药用植物分子育种奠定基础.[方法]基于白屈菜转录组数据,分析得到白屈菜TLP基因开放阅读框,以18S RNA为内参基因,采用qRT-PCR法检测CmTLP基因在不同温度(20(CK),10,0,-7,-20℃)下白屈菜植株中的相对表达量.用RT-PCR法克隆该基因并构建植物表达载体,电击法转化根癌农杆菌.[结果]qRT-PCR结果表明,CmTLP基因在-7℃、12 h时,相对表达量最高;-7℃、24 h时,相对表达量最低.克隆白屈菜TLP基因,命名为CmTLP.该基因开放阅读框长度为696 bp,编码由231个氨基酸组成的肽链;分子质量为24.66 ku,为酸性蛋白.系统发育树表明,CmTLP基因与博落回、月季、胡桃的氨基酸序列有较高的同源性.构建了植物表达载体pRI201-AN-CmTLP,并成功转化根癌农杆菌.[结论]克隆了白屈菜CmTLP基因,构建植物表达载体pRI201-AN-CmTLP,并成功转化根癌农杆菌.

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