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亚洲棉7号染色体分离及文库构建

文献类型： 中文期刊

作者： 彭仁海;刘玉玲;刘方;王春英;黎绍惠;张香娣;王玉红;王坤波

作者机构：

关键词： 亚洲棉;显微切割;微克隆

期刊名称：棉花学报

ISSN： 1002-7807

年卷期： 2012 年 24 卷 05 期

页码： 379-385

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法,建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术。单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后,产物以Southern杂交、简单重复序列(Simple sequencerepeats,SSR)引物扩增和荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)进行验证,构建了棉花单条染色体文库。克隆片段长度在150~1000 bp,平均为550 bp;文库包含1.38×105个克隆,覆盖染色体长度1倍左右,空载率为1%,滴度为1.3×106pfu.mL-1,单一拷贝和低拷贝比例达到59%以上,为该条染色体分子标记的筛选、重要基因克隆和定位、遗传图谱的饱和奠定基础。

分类号： S562

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