鸡毒霉形体TM-1基因原核表达载体的构建及表达
文献类型: 中文期刊
作者: 郝永清;王秀青;周艳君;童光志;高金亮;赵振华;乌尼
作者机构:
关键词: 鸡毒霉形体;TM1基因;表达载体构建;原核表达
期刊名称:中国兽医科技
ISSN: 1000-6419
年卷期: 2004 年 34 卷 04 期
页码:
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 对从含有鸡毒霉形体H3株TM 1基因的大肠埃希氏菌DH5α中提取的质粒,进行EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,获得了大约为786bp的目的片段。将此片段与经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切的线性原核表达载体pET 30a 1连接,转化宿主菌BL21(DE3),筛选阳性克隆。提取质粒,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其插入正确,从而构建成了重组表达载体。阳性克隆用IPTG诱导表达,表达产物经SDS PAGE电泳分析,证明其分子质量约为29ku;Western blotting分析表明,该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别,具有生物学活性。
分类号: S852.62
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