数字农科院2.0

苏云金芽孢杆菌cry1Aa14基因的分离、克隆及其表达

文献类型： 中文期刊

作者： 宋福平;陈中义;李国勋;王勤英;黄大昉;张杰

作者机构：

关键词： 苏云金芽孢杆菌;cry1Aa14基因;克隆;表达;杀虫活性

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2004 年 12 卷 02 期

页码： 188-191

收录情况： 北大核心

摘要： Bt25是中国自行分离的对小菜蛾(Plutellaxylotella)具有高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis),经PCR-RFLP鉴定含有cry1Aa基因。以全长基因PCR产物的粘端定向克隆的方法,设计1对特异引物,以Bt25质粒DNA为模板扩增cry1Aa全长基因。序列测定结果表明, 该基因编码区为3 552 bp,编码1 183个氨基酸,分子量为133.7 kD,pI 4.755。该基因序列已在GenBank注册,登记号为AY197341,并获得正式命名cry1Aa14。在氨基酸序列918~1180间,和已知的11种Cry1Aa存在22~23个氨基酸的差异(其中1094~1097的4个氨基酸无对应序列),而这段区域和Cry1Ab氨基酸序列的对应区域无差异。cry1Aa14全长基因插入Bt表达载体,获得了重组表达质粒pBYB1,转化Bt无晶体突变株HD73cry-,经过抗性筛选、DNA酶切分析和PCR检测,证实转化成功。SDS-PAGE分析表明,该基因在上述受体中能正常表达133 kD蛋白。杀虫生物测定结果表明,cry1Aa14表达产物对小菜蛾幼虫具有显著的毒杀作用,与cry1Aa12进行比较,毒力无明显差异。这种单基因菌株的发现及其基因的获得,为害虫抗性研究和高效工程菌的构建提供了重要实验材料。

分类号： Q786

  • 相关文献

[1]苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性. 姚江,郭巍,宋福平,高继国,黄大昉,张杰. 2005

[2]对鳞翅目害虫高毒力的Bt cry1Aa基因的分离克隆及表达. 张杰,陈中义,宋福平,李长友,胡玉琴,黄大昉. 2003

[3]苏云金芽孢杆菌Ly30株cry1Ac基因的克隆及表达. 张杰,宋福平,李长友,刘旭光,黄大昉. 2003

[4]苏云金芽孢杆菌cry1Ab13基因的克隆及表达研究. 张杰,宋福平,陈中义,王开梅,黄大昉. 2002

[5]对鳞翅目害虫高毒力的Btcry1Aa基因的分离克隆及表达. 张杰,陈中义,宋福平,李长友,胡玉琴,黄大昉. 2003

[6]对鳞翅目害虫高毒力的Bt cry1 Aa基因的分离克隆及表达. 张杰,陈中义,宋福平,李长友,胡玉琴,黄大昉. 2003

[7]对鞘翅目害虫高毒力Bt基因cry3Aα7的分离克隆及表达研究. 宋福平. 2002

[8]对鳞翅目害虫有活性的crylC基因的克隆和表达. 宋福平,张杰,韩岚岚,高继国,黄大昉. 2003

[9]苏云金芽孢杆菌杀蚊蛋白基因cry11Aa的克隆与表达. 孙建光,高俊莲,SoberonMario. 2006

[10]苏云金芽孢杆菌杀蚊蛋白基因cry11 Aa的克隆与表达. 孙建光,高俊莲,Soberon Mario. 2006

[11]苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究. 李长友,刘加宝,张杰,黄大昉. 2002

[12]小菜蛾高效Bt菌株的分离,生化特性及基因型鉴定. 朱勋,吴青君,张友军,刘春光,刘岩林,余亚军,景伟,薛原,杨峰山. 2011

[13]桂林喀斯特地貌分布区苏云金芽孢杆菌菌株的分离鉴定. 张静涛,束长龙,郝再彬,高继国,张杰,宋福平. 2009

[14]苏云金芽孢杆菌BtC008杀虫晶体蛋白基区鉴定、克隆及杀虫活性分析. 薛静,宋福平,檀建新,张杰,黄大昉. 2006

[15]苏云金芽孢杆菌菌株B-Hm-16的生物学特性及cry基因型鉴定. 李国勋,张杰,宋福平,黄大昉. 2007

[16]苏云金芽孢杆菌aizawai 7-29 δ-内毒素基因改造后的杀虫活性研究. 郭三堆,洪朝阳,徐琼芳,毛立群,范云六. 1993

[17]苏云金芽孢杆菌cry基因在大肠杆菌中表达产物和生物活性. 宋福平,李长友,张杰,赵奎军,黄大昉. 2002

[18]苏云金芽孢杆菌BtC008杀虫晶体蛋白基因鉴定、克隆及杀虫活性分析. 薛静,宋福平,檀建新,张杰,黄大昉. 2006

[19]小菜蛾高效Bt菌株的分离、生化特性及基因型鉴定. 朱勋,吴青君,张友军,刘春光,刘岩林,余亚军,景伟,薛原,杨峰山. 2011

[20]苏云金芽孢杆菌B-Pr-88菌株中cry2Ab4基因的表达和杀虫活性研究. 张杰,宋福平,韩岚岚,李国勋,黄大昉. 2007

作者其他论文 更多>>