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2型猪链球菌pnp基因缺失株与回补株的构建及其生物学特性的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 杨文琳;许秋;周龙玉;林龙华;柴霁芸;马彩萍;侯杰;祝瑶;张万江

作者机构：

关键词： 2型猪链球菌;pnp基因;基因缺失;生物学功能

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 3 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为研究2型猪链球菌(SS2) pnp基因的生物学功能,本研究通过基因无痕操作技术构建SS2 05ZYH33pnp基因缺失株Δpnp以及回补株CΔpnp,经PCR和测序鉴定结果表明,正确构建了pnp基因无痕缺失株和回补株。将05ZYH33、Δpnp以及CΔpnp分别在不同温度(28℃、37℃、42℃)培养后测定OD_(600nm)值,绘制各菌株的生长曲线；利用革兰氏染色后经镜检及透射电镜观察各菌株的形态结构；通过滴定微孔平板结晶紫法检测各菌株的生物被膜形成能力；采用接触法分析各菌株的溶血特性；于含不同抗生素的THB平板上培养各菌株,分析各菌株的药物敏感性；于氧化条件与酸性条件下培养各菌株,通过统计存活率评价各菌株的氧化耐受与酸耐受能力。结果显示,缺失株的生长速率明显低于野生株和回补株,且在冷应激条件下的生存能力下降；与野生株和回补株相比,缺失株细胞壁肽聚糖层的结构更加松散、溶血能力下降、生物被膜形成能力下降、对不同类型抗生素的敏感性增强、抗氧化与抗酸能力均下降。上述结果表明pnp基因是SS2的一个重要调节因子,参与调节细菌对外界环境变化的适应能力。本研究为科学防控猪链球菌病以及研发新型抗菌药物奠定基础。

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