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日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张旻;洪炀;傅志强;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;带电多泡体蛋白5;转录水平;组织定位;免疫保护

期刊名称：中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版）

摘要： 目的克隆、表达日本血吸虫（Schistosomajaponicum，S.japonicum）带电多泡体蛋白5（CHMP5），并对其生物学特性进行研究。方法利用PCR扩增S.japonicumCHMP5基因目的片段，构建重组质粒pET28a（+）-CHMP5，并对该基因进行生物信息学分析。利用荧光定量PCR检测CHMP5在不同时期虫体中的转录水平。对体外表达的重组CHMP5蛋白进行纯化与质谱鉴定，并通过westernblot检测其反应原性。利用免疫组化实验分析CHMP5在虫体中的分布。以小鼠为动物模型，评估重组CHMP5蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果。结果S.japonicumCHMP5的开放阅读框为675bp，编码224个氨基酸，具有6个B细胞抗原表位;;主要定位于S.japonicum虫体的体被上。CHMP5基因在35d和42d虫体中的转录水平高于其它检测时期的，且42d雌虫中的转录水平约是42d雄虫的3倍。克隆表达的重组CHMP5蛋白其理论分子量约为29kDa，具有较好的反应原性;;用其免疫小鼠24d，即可使小鼠产生较高水平的IgG抗体，并最终诱导产生18.96%的减虫率（P<0.05）和42.98%的肝脏减卵率（P<0.01）。结论成功克隆、表达了S. japonicum体被蛋白CHMP5，其在不同发育时期虫体中均有表达，获得的重组CHMP5蛋白可诱导小鼠产生部分的免疫保护效果，为深入探讨S. japonicum CHMP5的生物学功能提供了基础。

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