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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 付宁宁;周露佳;陈梦莉;周黎笋;陈小珺;董妮华;肖长广;邱亚峰;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;马志永;魏建超

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;GP4蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP4蛋白多克隆抗体，本研究选取PRRSV SH1毒株的GP4蛋白基因序列优化合成，并将其克隆至原核表达载体pET-28a中，获得重组表达质粒pET-28a-GP4。经IPTG诱导表达纯化后获得带有His标签的重组蛋白rGP4，免疫小鼠制备多克隆抗体，使用间接ELISA法检测多克隆抗体效价，间接免疫荧光试验（IFA）和Western blot检测抗体特异性。结果表明：重组GP4蛋白主要以包涵体形式表达，相对分子质量大小约为24 kDa，ELISA方法检测其抗体效价最高可达1:12 800，Western blot和IFA检测多克隆抗体能特异性识别重组GP4蛋白和PRRSV，本研究成功制备获得了重组PRRSV GP4蛋白及其多克隆抗体。

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