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猪圆环病毒2d型病毒样颗粒疫苗的制备及发酵工艺研究

文献类型： 中文期刊

作者： 王运航;吕熙;段梦迪;魏甜;李毅;张雅雅;陈相杨;郭慧琛;孙世琪;白满元;敬晓棋

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2d型;病毒样颗粒;大肠杆菌表达系统;发酵工艺

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为制备猪圆环病毒2d型（porcine circovirus type 2d， PCV2d）病毒样颗粒（virus-like particles， VLPs）疫苗并对其免疫效果进行评价。本研究采用原核表达系统表达PCV2d Cap蛋白，并对其发酵工艺条件进行了优化，去除His-SUMO标签使其体外自组装形成VLPs，通过SDS-PAGE和Western-blot进行验证，采用透射电镜和纳米粒度仪进行表征，将验证正确的VLPs免疫小鼠，测定其抗体水平和细胞因子水平。结果显示，在0.5 mmol/L IPTG、N源补料速率为12%时，蛋白表达量最高，利用透射电镜、纳米粒度仪进行表征鉴定，发现PCV2d可自组装形成VLPs，粒子直径约为20～25 nm。PCV2d VLPs与ISA 201佐剂混合免疫小鼠，特异性抗体滴度达到1∶512以上，中和抗体滴度达到1∶32以上，IL-4和IFN-γ细胞因子水平均可达到80 pg/mL，且明显高于PBS组。综上所述，本研究利用原核表达系统构建表达并成功获得PCV2d VLPs，且可以诱导机体产生良好的细胞免疫和体液免疫，这为猪圆环病毒2d型疫苗及猪圆环病毒多价疫苗的研制奠定了基础。

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