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禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 牛秀杰;赵妍;薛美;王云峰

作者机构：

关键词： SYBR GreenⅠ;实时荧光PCR;禽网状内皮增殖病毒;gag基因;LTR基因

期刊名称：黑龙江农业科学

ISSN： 1002-2767

年卷期： 2015 年 04 期

页码： 47-52

摘要： 为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果表明:该方法线性关系良好;敏感性能检测到10拷贝标准品;能特异性检测REV样品,不与其它禽相关病原发生交叉反应;板内、板间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法对人工感染REV的鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、腺胃和法氏囊进行初步检测,结果显示法式囊中的含量最高。

分类号： S852.65

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