数字农科院2.0

p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘超;邱亚峰;沈阳;刘庆伟;马志永

作者机构：

关键词： p53;慢病毒载体;RNA干扰;筛选;细胞系

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2010 年 0 卷 07 期

页码： 83-88

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的Vero细胞模型。设计针对p53基因的shRNA序列,构建p53shRNA慢病毒载体并感染Vero细胞;嘌呤霉素筛选阳性细胞,局部消化法挑选细胞克隆;利用RT-PCR和West-ernblot检测p53的表达水平;利用虫荧光素酶报告系统,分析p53的转录激活功能。RT-PCR和Westernblot结果显示,慢病毒介导的shRNA有效地沉默p53基因表达;与对照组细胞相比,干扰组细胞的p53的转录激活功能明显降低。慢病毒介导的shRNA高效、稳定地沉默了p53基因的表达,同时,有效地降低了p53的转录激活功能,为研究p53的生物学功能提供了有利的工具。

分类号： Q78

  • 相关文献

[1]表达PRRSV N蛋白稳定细胞系的构建与鉴定. 付宁宁,肖长广,陈梦莉,邱亚峰,李宗杰,李蓓蓓,刘珂,邵东华,马志永,魏建超. 2023

[2]羊源GADD45A基因过表达Vero细胞系的构建及其对PPRV复制的影响. 丁海燕,袁莉刚,赵竟涵,郑海学,尚佑军,李丹. 2025

[3]动物转基因新技术研究进展. 陈青,曹文广. 2011

[4]山羊myostatin基因慢病毒RNA干扰载体的构建及效果验证. 陆健,张世芳,张小宁,刘佳森,李碧春,赵福平,张莉,魏彩虹,杜立新. 2012

[5]靶向抑制PRRSV复制的Nsp9/shRNA的筛选及干扰. 吴锦艳,田宏,陈妍,王光祥,尚佑军,张志东. 2019

[6]流感病毒感染的p53+/+小鼠和p53-/-小鼠肺组织中细胞凋亡相关基因表达变化的分析. 晏文君,史子学,魏建超,朱紫祥,邓绪芳. 2012

[7]流感病毒感染p53+/+和p53-/-小鼠肺组织中TLR及其相关基因表达研究. 晏文君,史子学,魏建超,邓绪芳,朱紫祥,邵东华,王少辉,李蓓蓓,马志永. 2012

[8]CDK2和P53在细胞中心体复制与调控中的作用. 聂昊,杜卫华,郝海生,王宗礼,王栋,朱化彬. 2008

[9]肿瘤抑制因子p53功能及其抗病毒作用研究进展. 晏文君,吴开宝,马志永. 2012

[10]肿瘤抑制因子-P53的翻译后水平修饰. 那日苏,刘长青,陆涛峰,道尔吉,关伟军,马月辉. 2008

[11]Tet-On系统调控p53稳定表达的H1299细胞系的建立与应用. 武专昌,王鑫,魏建超,杨逸凡,赵秋华,邵东华,李玉明,齐鹏飞,刘珂. 2015

[12]抑制体细胞衰老促进诱导性多潜能干细胞(iPSC)生成的研究进展. 魏如雪,郝海生,赵学明,杜卫华,朱化彬. 2015

[13]鸡马立克病病毒Meq蛋白抑制p53的转录激活作用. 李向东,沈阳,邱亚峰,马志永. 2008

[14]梅花鹿ColX基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定. 褚文辉,赵海平,杨福合,邢秀梅,李春义. 2010

[15]慢病毒载体的构建及其应用于转基因动物的研究进展. 孙克宁,朱化彬,林峰,王栋,郝海生,杜卫华,赵学明. 2010

[16]慢病毒介导多短发卡RNA串联载体构建与体内外抗口蹄疫效果评估. 张晓溪,李兰玉,刘庆友,郑海学,李湘萍,崔奎青,石德顺. 2014

[17]梅花鹿Col Ⅹ基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定. 褚文辉,赵海平,杨福合,邢秀梅,刘国庆,李春义. 2009

[18]梅花鹿ColⅩ基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定. 褚文辉,赵海平,杨福合,邢秀梅,刘国庆,李春义. 2009

[19]梅花鹿S100A4基因RNAi重组慢病毒载体的构建. 魏明立,褚文辉,赵海平,王大涛,孙红梅,李春义. 2012

[20]慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建. 曾飒,秦晓东,何祥一,车春晓,张潇,解斯羽,孙贵军,王立鹤. 2016

作者其他论文 更多>>