H1N1亚型猪流感病毒HA1基因原核表达及鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 阮宝阳;王林;宫晓倩;汪秀会;刘晓敏;汪琪;单同领;李泽君;刘芹防;陈鸿军;滕巧泱;童光志;于海
作者机构:
关键词: HA1基因;禽源H1N1亚型猪流感病毒;原核表达;可溶性;抗原性
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2015 年 04 期
页码: 14-18
摘要: 本研究利用RT-PCR技术扩增禽源H1N1亚型猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)的HA1基因片段,将其连接至p Cold-TF载体上,菌液鉴定为阳性的克隆经测序验证正确后,提取质粒转化至高表达的表达宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导并大量表达目的蛋白。表达产物经过纯化及SDS-PAGE电泳分析,表明重组蛋白以可溶性形式在上清中大量表达,大小约90 k Da,且在15℃、0.8 mmol/L IPTG条件下诱导24 h表达效果最好。通过Ni柱纯化后,经Western blot分析表明重组表达的蛋白能与禽源H1N1亚型SIV阳性血清发生特异性反应,具有较好的反应原性。
分类号: S852.651
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