三种鸽源病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用
文献类型: 中文期刊
作者: 倪维玲;孟利佳;乔思娜;陈立功;徐倩倩;侯绍华;董世山
作者机构:
关键词: 鸽疱疹病毒;鸽圆环病毒;鸽源腺病毒;多重PCR
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2021-2022年度) ; ; 科技核心(2021版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为建立一种可以快速检测鸽疱疹病毒(PiHV)、鸽圆环病毒(PiCV)和鸽源腺病毒(PiADV)的三重PCR方法,本研究针对3种病原的保守区域分别设计合成了3对特异性扩增引物,在优化反应体系、反应条件的基础上,分别对其特异性、敏感性和重复性进行验证,建立了能够快速检测以上3种病原的多重PCR方法,并对121份临床样品进行了检测。通过各项反应条件优化,确定PiHV、PiCV、PiADV引物体积比为1∶1∶2,退火温度为58 ℃时,扩增效果最好。敏感性试验显示,PiHV、PiCV和PiADV的最低检出量均为1.0×101 copies/μL 。特异性试验显示,建立的多重PCR方法与鸽新城疫病毒(NDV)、鸽痘病毒(PPV)、鸽轮状病毒(PiRV)没有特异性反应。利用本研究建立的多重PCR方法对121份临床样品进行检测,结果与单重PCR结果一致。综上所述,本研究建立的方法可用于鸽养殖场或公棚的PiHV、PiCV、PiADV快速检测。
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