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禽网状内皮组织增生症病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 韩京哲;黄萌萌;许萌萌;王国栋;张玉龙;刘润杭;于航博;吴子文;柯二靖;凌丹;于晓雪;高玉龙;李留安;祁小乐

作者机构：

关键词： 禽网状内皮组织增生症病毒;囊膜蛋白gp90;原核表达;杂交瘤细胞;单克隆抗体

期刊名称：中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为研制禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus,REV）囊膜蛋白gp90单克隆抗体，试验构建重组原核表达质粒pCold-gp90，转化至感受态细胞BL21中进行蛋白诱导表达；采用纯化的gp90蛋白免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合技术制备杂交瘤细胞，利用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式细胞分选技术筛选鉴定阳性杂交瘤细胞，并制备单克隆抗体腹水，对单克隆抗体的亚型、效价进行测定；并初步测试单克隆抗体在Western blot和间接免疫荧光试验（IFA）中检测gp90蛋白和REV中的应用效果。结果显示：REV囊膜蛋白gp90获得成功表达和纯化，获得3株能稳定分泌REV gp90单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株，该单克隆抗体亚型均为IgG1、Kappa，腹水效价均可达1∶64 000；该单克隆抗体不仅可用于Western blot或IFA检测gp90原核表达蛋白和真核表达蛋白，还可用于IFA检测REV的TCID50效价。研究表明，成功制备的REV gp90单克隆抗体为进一步的REV检测方法建立和gp90蛋白功能研究提供了重要工具。

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