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CELO病毒fiberl基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王凤雪;王云峰;智海东;王玫;童光志

作者机构：

关键词： 鸡胚致死孤儿病毒;fiberl基因;原核表达;抗原活性;诊断试剂盒;包涵体肝炎

期刊名称：中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 035 卷 006 期

页码： 468-471

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiberl基因(GenBank序列号u46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiberl基因C端(包含Knob―S区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX-6P―1,获得的阳性克隆命名为pGEX―AF807.序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiberl基因序列完全一致.将pGEX―AF807转化大肠埃希氏菌DH5a,经37C、0.6mmol/L IPTG诱导表达5h,SDS―PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀.结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7％.用CELO病毒多克隆血清做Western blotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性.

分类号： S852.659.1%S858.31

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