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鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 许萌萌;黄萌萌;牛鑫鑫;王国栋;于航博;张玉龙;韩京哲;韩金泽;刘润杭;吴子文;于晓雪;王笑梅;高玉龙;李留安;祁小乐

作者机构：

关键词： 鸡;pro-IL-1β;克隆;表达;多克隆抗体;炎症

期刊名称：中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制，试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体（Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β）基因，原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白，用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体，对该抗体进行ELISA效价检测和鉴定，并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示：重组蛋白pro-IL-1β成功表达，分子量约37 ku，能与His标签抗体发生特异性结合反应；获得了ELISA效价高于1∶32 000的鼠抗pro-IL-1β多克隆抗体，该抗体可通过间接免疫荧光试验（IFA）检测到pro-IL-1β真核表达蛋白，也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达蛋白和真核表达蛋白，还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒（IBDV）诱发的巨噬细胞HD11内源性pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明，成功制备鸡pro-IL-1β多克隆抗体，为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。

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