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鸭甲型肝炎病毒反向遗传操作系统的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 硕盾;李鲁兆;滕巧泱;苑纯秀;闫大为;张志飞;潘学;许榜丰;刘芹防;李泽君

作者机构：

关键词： 鸭甲型肝炎病毒;反向遗传;病毒拯救

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 鸭病毒性肝炎（DVH）的高发病率和对雏鸭的高致死率已成为制约我国养鸭业发展的一大难题，目前危害最为严重的DVH主要由鸭甲型肝炎病毒（DHAV）引起，DHAV主要有两种基因型，分别为 DHAV-1和DHAV-3，主要攻击4周龄以内雏鸭，引起急性肝炎和雏鸭死亡。目前主要通过鸡胚连续传代致弱来研制弱毒疫苗，耗时较长。因此，急需一种快速改造DHAV的技术来提高疫苗研究速度。本研究利用RT-PCR方法扩增DHAV-1强毒株（SH8）和DHAV-3强毒株（SH52）的全基因组，将全基因插入pUC19载体构建了重组质粒，以重组质粒为模板、利用融合PCR方法扩增DHAV全基因组，转录为RNA后转染至鸭胚肾（DEK）细胞，最终成功获得两株拯救毒株。将两株拯救毒株在9日龄麻鸭胚连续盲传5代收获病毒，分别命名为r-SH8和r-SH52。将SH8、r-SH8、SH52和r-SH52分别接种9日龄麻鸭胚，发现拯救毒株与野毒株相比，在9日龄麻鸭胚中引起的胚体病变情况相同，病毒滴度相近。本研究成功构建 DHAV-1和DHAV-3反向遗传操作系统，为快速定向突变致弱DHAV奠定了基础。

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