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FTO基因对鸡肌内脂肪细胞脂沉积的调控作用

文献类型： 中文期刊

作者： 黄华云;隋雨乐;孔熠;梁忠;杨苗苗;刘星;韩威

作者机构：

关键词： 鸡;FTO;肌内脂肪

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2025 年 22 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： [目的]脂肪量和肥胖相关基因(FTO)作为与人类和畜禽脂肪沉积密切相关的基因,其在鸡肌内脂肪沉积中的作用尚未见相关报道.通过明确 FTO 对鸡肌内脂肪细胞增殖及脂滴沉积的影响,筛选响应其调控的关键通路与基因,为解析鸡肌内脂肪沉积分子调控网络提供理论依据.[方法]构建FTO慢病毒表达载体,外源转染FTO慢病毒表达载体和阴性对照载体至鸡原代肌内脂肪细胞,利用荧光倒置显微镜观察荧光,实时荧光定量 PCR(qPCR)检测转染组和阴性对照组FTO mRNA的表达变化,确保FTO慢病毒表达载体成功转染至细胞;FTO慢病毒表达载体转染 72 h和 96 h后,CCK8 试剂盒检测转染组和阴性对照组细胞增殖变化;转染后 6 d,油红 O染色,异丙醇萃取脂滴,检测肌内脂肪细胞脂滴沉积的变化,甘油检测试剂盒检测培养基中甘油含量变化;通过转录组测序、生物信息学分析及蛋白互作(PPI)分析,筛选响应 FTO调控肌内脂肪细胞脂沉积的关键通路和基因.[结果]FTO慢病毒表达载体转染至肌内脂肪细胞,qPCR 结果表明,与对照组相比,转染组 FTO mRNA 表达极显著升高(P＜0.01),表明 FTO慢病毒表达载体成功转染至细胞;转染FTO慢病毒表达载体 72 和 96 h 后,与对照组相比,肌内脂肪细胞的增殖能力显著降低(P＜0.05);FTO慢病毒表达载体转染肌内脂肪细胞 6 d 后,转染组细胞脂滴沉积能力显著高于阴性对照组(P＜0.05),培养基中的甘油含量显著低于阴性对照组(P＜0.05).转录组测序结果表明:共筛选到 164 个差异表达基因响应FTO调控肌内脂肪沉积,其中上调基因 71 个,下调基因 93 个;差异表达基因KEGG富集分析结果显示,共有 13 信号通路显著富集,其中黏着斑,肌动蛋白细胞骨架的调控,丝裂原活化蛋白激酶信号通路,间隙连接,细胞因子-细胞因子受体相互作用,叉头盒蛋白 O 信号通路,细胞凋亡,C 型凝集素受体信号通路,转化生长因子-β 信号通路(P＜0.05)通路与脂肪代谢相关;进一步筛选响应FTO调控的关键通路和基因,将显著富集通路里的差异基因做 PPI 分析,结果显示 PIK3R2,FGF16,FGF9和 RHOA为响应 FTO调控鸡肌内脂肪细胞脂沉积的关键基因,显著富集通路——肌动蛋白细胞骨架调控通路为核心通路.[结论]FTO具有抑制鸡肌内脂肪细胞增殖、促进脂沉积、抑制脂肪分解的作用;PIK3R2、FGF16、FGF9和 RHOA(肌动蛋白细胞骨架的调控通路)是响应FTO调控肌内脂肪细胞脂沉积的关键基因/通路.

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