文献类型： 中文期刊
作者： 童武;周艳君;徐彦召;姜一峰;王亚欣;张善瑞;朱建平;虞凌雪;孙晶;陈焕春;童光志
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸道综合征病毒;猪瘟病毒;感染性分子克隆;重组病毒
期刊名称：中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2012 年 34 卷 07 期
页码： 505-509
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为构建表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),本研究首先利用高致病性PRRSV弱毒疫苗HuN4-F112株的感染性分子克隆作为平台,构建了一个在nsp2区有缺失的感染性分子克隆,命名为pHuN4-F112-△480-620。以pHuN4-F112-△480-620作为载体,采用突变PCR的方法将CSFV的主要保护性抗原E2基因1 bp～9 99 bp,1 bp～600 bp,1 bp～330 bp及256 bp～330 bp基因片段分别插到nsp2中aa 480～aa 620位氨基酸缺失编码区域。结果显示,插入完整E2基因或较大E2基因片段的重组PRRSV cDNA质粒均未能拯救出病毒,只有插入较小的E2基因片段(256 bp～330 bp)的重组病毒cDNA质粒成功地拯救出了重组病毒rPRRSV-F112-E2(256-330),拯救的病毒能够在MARC-145细胞上引起明显的细胞病变,而且生长速度明显高于其亲本病毒,间接荧光检测表明该重组病毒能够表达外源基因。
分类号： S852.65
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