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结核分枝杆菌牛变种C68001转座子突变体库的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 时文健;徐磊;张泽;杨蕊;张广智;许霄峰;辛凌翔;王楠;鑫婷

作者机构：

关键词： 结核分枝杆菌牛变种;MycoMar T7;突变体库;噬菌体

期刊名称：微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 【背景】结核分枝杆菌牛变种（Mycobacterium tuberculosis variant bovis）可以感染人和多种动物，是重要的人兽共患病原菌。【目的】以结核分枝杆菌牛变种C68001为母本菌株，利用MycoMar T7转座子系统，构建结核分枝杆菌牛变种突变体库，为深入探究结核分枝杆菌牛变种基因功能和致病机制提供技术平台。【方法】以C68001为母本菌株，对其全基因序列进行分析预测；筛选温敏型噬菌体，优化噬菌体扩增条件和侵染条件；获得高库容的结核分枝杆菌牛变种C68001突变体库。【结果】基于Nanopore三代和二代测序技术，绘制细菌基因组完成图，C68001的完整基因组大小为4.342 M，含有3 998个基因。成功筛选到温敏型噬菌体，且滴度高于1×1011 PFU/mL，以MOI=10、侵染C68001菌株3 h后，获得9 216个单克隆的转座子突变体，随机挑选7个克隆，进行PCR鉴定，证实转座子成功插入母本菌株。【结论】成功构建了结核分枝杆菌牛变种C68001的突变体库。

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