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牛副流感病毒3型TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 董秀梅;朱远茂;蔡虹;王姝;吕闯

作者机构：

关键词： 实时荧光定量RT-PCR;TaqMan探针;牛副流感病毒3型

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 06 期

页码： 617-623

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)膜蛋白M基因设计引物及探针,以体外转录法制备的cDNA标准品为模板,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性、重复性进行了测定,并对人工感染BPIV3的牛群临床样本进行了检测。结果显示,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR的最低检测限为17.6copies/μL,同时进行批内、批间5次重复性试验,变异系数均小于2.5%。应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛腺病毒3型、牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒1型,结果均为阴性,说明建立的方法特异性较强。用建立的方法检测人工感染BPIV3的犊牛鼻拭子样本,检测结果与样本TCID50的测定结果相符合,但比其更敏感。结果表明,本试验中建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR可以作为BPIV3早期诊断及定量分析的有效技术手段。

分类号： S858.23

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