数字农科院2.0

基因Ⅱ型非洲猪瘟病毒变异株EP402R基因质粒标准物质研制

文献类型： 中文期刊

作者： 叶家美;穆颖;张媛;张晶晶;周梦棋;史莉圆;姜怀玉;毕一鸣;邢薿文;朱远茂;赵东明;倪建强;顾小雪;翟新验;李琦;王传彬;刘玉良

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;基因Ⅱ型;变异株;EP402R基因;标准物质;稳定性

期刊名称：病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 针对我国目前缺乏基因Ⅱ型非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）变异株EP402R基因（编码CD2v蛋白）核酸标准物质现状，本研究研制了含不同拷贝数浓度的基因Ⅱ型ASFV变异株EP402R基因强阳性、阳性和弱阳性质粒标准物质。通过分子生物学技术构建基因Ⅱ型ASFV变异株EP402R基因质粒，制备含不同拷贝数浓度的质粒标准物质。采用芯片式数字PCR(cdPCR)进行精确定值，并对其进行纯净性、特异性、均匀性及稳定性等检验和质量评估，确保其满足实际应用要求。结果表明，所研制的标准物质核酸分子拷贝数浓度分别为3.31×10～4拷贝/μL、3.14×10～3拷贝/μL和1.77×10～2拷贝/μL，该标准物质纯净、均匀、特异、稳定；在-20℃、4℃、25℃和37℃条件下，该标准物质可分别稳定保存至少12个月、4个月、14d和9d；经10次反复冻融后仍稳定；将该标准物质模拟运输至广州、上海和新疆后，稳定性未发生变化；基质效应和检测方法互通性评估结果显示，该标准物质在cdPCR与荧光定量PCR(qPCR)检测方法间表现出较好的一致性，在试用上与临床样本间具有良好的互通性。合作定值和试用结果显示，所制备的标准物质量值准确。综上所述，本研究所研制的标准物质具有良好的纯净性、均匀性和稳定性，定量精确，适用于不同场景下基因Ⅱ型ASFV变异株核酸检测，为ASFV变异株早期诊断和防控等提供可靠技术支撑，助力提升我国ASF诊断和防控技术水平。

分类号：

  • 相关文献

[1]孔雀石绿及隐性孔雀石绿溶液标准物质稳定性研究. 杨梦瑞,赵悦,王敏,周剑,张丽媛,王彤彤. 2018

[2]氯吡脲纯度标准物质研制. 陈文文,杨梦瑞,王敏,刘权辉,周剑,王彤彤. 2022

[3]核糖核酸标准物质研制与应用进展. 王丹,赵文江,齐鑫,李欣然,李凯,樊丽,李亮. 2024

[4]非洲猪瘟病毒Georgia 2007/1株CD2v蛋白的原核表达及多克隆抗体制备. 任肖,吴竞,于海男,林伟东,侯绍华,郭晓宇,朱鸿飞. 2019

[5]The p15 protein is a promising immunogen for developing protective immunity against African swine fever virus.. 于琪,,付望君,,王祥喜,,赵东明. 2025

[6]Cell-adapted African swine fever virus Pig/HLJ/18 is highly attenuated but fails to induce immune protection against a challenge with its parental virus. 王婉,,,尹丽,,张振江,,刘帆,,步志高,,朱远茂,,赵东明. 2025

[7]禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究. 曾显营,钟功勋,李雁冰,施建忠,姜永萍,王彦妮,万晓鹏,毛胜刚,田国彬,陈化兰. 2010

[8]我国猪伪狂犬病变异株研究概况. 向广韬,孙元,罗玉子,夏水利,雷建林,仇华吉. 2016

[9]鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LSD/05Ⅰ的分离、鉴定及弱毒疫苗对气管的保护. 王钰,李成仁,张晓楠,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,孔宪刚. 2008

[10]犬瘟热病毒疫苗变异株的分离及其P1蛋白的表达、鉴定. 于萍萍,贾红,侯绍华,袁维峰,郭晓宇,崔治中,朱鸿飞. 2012

[11]猫杯状病毒新型变异株的遗传特征分析. 刘春国,刘永相,刘大飞,郭东春,田进,李志杰,刘家森,曲连东. 2015

[12]猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株自然感染病例的病理分析. 贺延玉,尚佑军. 2010

[13]H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究. 田国彬,曾显营,钟功勋,姜永萍,李雁冰,施建忠,毛胜刚,冯菊艳,王君伟,陈化兰. 2009

[14]禽流感变异株灭活疫苗(H5N1;Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究. 曾显营,钟功勋,李雁冰,施建忠,姜永萍,王彦妮,万晓鹏,毛胜刚,田国彬,陈化兰. 2010

[15]IBR病毒实验室变异株DNA的酶切分析及物理图谱. 童光志. 1991

[16]一株鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离与鉴定. 刘明春,康丽娟,刘思国,江国托,赵玉军,汉丽梅. 2000

[17]禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡,鸭和鹅的免疫效果研究. 曾显营,钟功勋,李雁冰,施建忠,姜永萍,王彦妮,万晓鹏,毛胜刚,田国彬,陈化兰. 2010

[18]猪伪狂犬病病毒天津变异株R13139对猪的致病性研究. 任卫科,张莉,李秀丽,池晶晶,田向学,李富强,董志民,鄢明华,仇华吉. 2018

[19]伪狂犬病病毒变异株gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 武吉强,徐晶晶,童武,王涛,叶超,郑浩,单同领,童光志,李国新. 2017

[20]伪狂犬病病毒变异株和经典株对小鼠致病力差异的研究. 王亚林 ,,祁寒松 ,,仇华吉 ,,孙 元. 2019

作者其他论文 更多>>