禽呼肠孤病毒特异性单克隆抗体的制备及阻断ELISA检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 赵璐;黄聪;黄远玲;韩靖宜;李鸿昌;陈鸿军;陈宗艳
作者机构:
关键词: 禽呼肠孤病毒;σC蛋白;单克隆抗体;阻断ELISA
期刊名称:中国家禽
ISSN: 1004-6364
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为建立检测禽呼肠孤病毒(ARV)血清抗体阻断ELISA方法,试验采用浓缩的ARV-AH20株病毒粒子免疫5周龄BALB/c小鼠,利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,并通过间接ELISA和免疫荧光试验(IFA)进行阳性杂交瘤细胞亚克隆筛选,获得两株稳定分泌针对σC蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株H9B2D77、B4E4B10。选择H9B2D77株作为检测抗体、重组σC蛋白作为包被抗原,经条件优化,建立了一种检测ARV抗体的阻断ELISA方法。结果显示:该方法与常见鸡源病原的抗体阳性血清均不存在交叉反应,批间和批内变异系数均小于6%;对48份鸡血清样品的检测,该方法与IFA具有100%的总体符合率。综上所述,基于禽呼肠孤病毒特异性单克隆抗体建立的阻断ELISA方法特异性高,重复性好,可用于ARV抗体检测。
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