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口蹄疫病毒通用型结构蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 张慧艳;李坤;孙梦阳;邢向川;付元芳;李平花;李冬;卢曾军;曹轶梅

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒;结构蛋白VP2;通用型;间接ELISA

期刊名称:中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2025 年

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收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)

摘要: 为建立口蹄疫病毒(FMDV)O型、A型、Asia 1型通用结构蛋白抗体检测方法,本研究用FMDV各血清型间高度保守的结构蛋白VP2氨基端短肽为抗原,经过条件优化,建立了可检测牛血清中FMDV不同血清型结构蛋白抗体的间接ELISA方法,并分析了该方法的敏感性、特异性、重复性以及与液相阻断ELISA(LPB-ELISA)的符合性。结果显示,该短肽最佳包被浓度为2 μg/mL,最适封闭液为1% BSA+5%蔗糖,血清最佳稀释度为1∶4,酶标二抗稀释比例为1∶5 000。以约登指数最大作为临界值,测定其敏感性为87.5%,特异性为93%,与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的阳性血清均未出现交叉反应,且批间与批内变异系数均≤10%。与LPB-ELISA的符合率为92.59%。该方法耗时短、操作简洁,可检测牛血清中FMDV不同血清型结构蛋白抗体,为FMDV感染的诊断和群体免疫状况的评估提供了一种通用方法。

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