口蹄疫病毒vp1基因的克隆与植物双元表达载体的构建
文献类型: 中文期刊
作者: 王宝琴;王小龙;张永光;潘丽;王文秀
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;vp1基因;克隆;三亲融合;双元表达载体;根癌农杆菌
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2007 年 29 卷 03 期
页码: 166-169
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 通过RT-PCR法获得阿克苏(Akesu/O/58)FMDV结构蛋白基因vp1,将该基因克隆到pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。将vp1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pBin438,构建重组中间表达载体pBinVP1。采用三亲融合法构建植物双元表达载体pBinFMDV-VP1。结果表明:vp1基因为639bp。重组中间表达载体pBinVP1经BamHⅠ/SalⅠ双酶切、PCR扩增和序列测定,表明vp1基因、Kozak序列等插入pBinVP1中。在含50mg/L卡那霉素、25mg/L链霉素和50mg/L利福平的YEB培养基上筛选及对融合农杆菌质粒进行vp1基因的PCR检测,证明植物双元表达载体pBinFMDV-VP1构建正确。
分类号: S852.5
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