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山羊副流感病毒3型NP蛋白B细胞表位生物信息学分析及其多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 廖娟;高小龙;王小龙;柳亚琳;张海杰;任善会;杨毅;包世俊;韩宇

作者机构：

关键词： 山羊副流感病毒3型(CPIV3);NP蛋白;生物信息学分析;原核表达;多克隆抗体制备

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2026 年 34 卷 02 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 山羊副流感病毒3型(Caprine parainfluenza virus type 3, CPIV3)属副黏病毒科呼吸道病毒属，是山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)呼吸道疾病的重要病原之一，严重影响我国羊养殖业的健康发展。为了制备CPIV3核衣壳蛋白(nucleocapsid protein, NP)的多克隆抗体，为CPIV3致病机制和疫病防控研究提供生物学材料，本研究基于CPIV3/SX/2024毒株基因序列，对其B细胞表位进行预测分析，利用PCR扩增NP全长基因，构建原核表达重组质粒并利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)进行目的蛋白诱导表达，蛋白经过纯化后免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)制备多克隆抗体，并对其生物学特性进行分析。结果表明，CPIV3 NP蛋白存在多个潜在B细胞表位，目的基因片段大小约为1 625 bp，与预期结果相符；成功构建原核表达质粒，命名为p ET28a-CPIV3-NP；该重组质粒经IPTG诱导后成功表达目的蛋白，分子量大小约为60 kD，目的蛋白主要在包涵体中表达，最优表达条件为37℃，浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导8 h。目的蛋白免疫小鼠后制备的多克隆抗体能够与CPIV3发生特异性反应，抗体效价达1∶512 000，具有良好的抗原免疫原性。本研究为CPIV3的致病机制和诊断防控技术研究提供重要的实验材料。

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