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胶质类芽胞杆菌PCR快速检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 王璇;马鸣超;关大伟;姜昕;李力;丁延芹;李俊

作者机构：

关键词： 胶质类芽胞杆菌;PCR检测;特异性引物

期刊名称：微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2011 年 51 卷 11 期

页码： 1485-1493

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】胶质类芽胞杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)是微生物肥料广泛应用的功能菌种之一,筛选并鉴定其特异性引物,建立该菌种快速检测方法,对微生物肥料产品检测和评价至关重要。【方法】本文筛选了胶质类芽胞杆菌基因间的一段非编码序列作为特异性引物(orf06701-F:5'-ATGGAGGAAACATGGGGTGA-3'/orf06701-R:5'-TCAGGAATGAAGGCCCCCTT-3'),通过PCR反应条件/体系的优化、特异性及灵敏度检测,建立了胶质类芽胞杆菌快速检测方法。【结果】研究表明,该引物仅能在以胶质类芽胞杆菌为模板时特异性扩增333bp保守序列,其检出灵敏限度为每微升反应体系400-1000个细胞,以实验选取的类芽胞杆菌属其他菌株和芽胞杆菌属菌株为模板时均不能扩出该序列,该引物具有良好的特异性;同时,用该方法成功地鉴定了从土壤中分离得到的胶质类芽胞杆菌,并且得到的特异性片段序列同源性达到100%。【结论】本研究方法为微生物肥料中胶质类芽胞杆菌的检测及生态评价提供技术支撑。

分类号： S154.3

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