数字农科院2.0

重叠PCR法构建副猪嗜血杆菌外源打靶基因

文献类型： 中文期刊

作者： 张念章;储岳峰;赵萍;高鹏程;贺英;逯忠新

作者机构：

关键词： 副猪嗜血杆菌;重叠PCR;外源打靶基因

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2011 年 0 卷 07 期

页码： 186-190

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到Hup-kan-Hdown的量最多。将此外源打靶基因的两端引入PstI和SacI酶切位点,克隆至具有迁移作用的自杀质粒pDS132,构建了可在大肠杆菌E.coliSM10-λpir中稳定遗传的打靶载体,为下一步建立副猪嗜血杆菌的高效基因打靶系统奠定基础。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]Cry1Ac的绿色荧光蛋白GFP标记及其在棉铃虫幼虫中肠的定位分布. 张永军,王桂荣,梁革梅,高继国,吴孔明. 2007

[2]λpL/pR-cI857温控系统的改造及其对大肠杆菌菌蜕制备的影响. 董洪亮,于圣青,韩先干,白灏,何亮. 2012

[3]副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白A基因的原核表达与鉴定. 黄晓慧,辛伟,魏建忠,连凯琪,郑海学,朱启运,才学鹏,李郁. 2012

[4]副猪嗜血杆菌感染豚鼠试验及在其体内的分布. 高鹏程,储岳峰,赵萍,贺英,逯忠新. 2009

[5]专家热线. 崔益洙. 2004

[6]副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶基因序列分析与推导蛋白三维结构的分子模拟. 马艳平,张杰,陈豪泰,马丽娜,赵娜,丁耀忠,刘文倩,王猛,刘永生. 2011

[7]副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验. 陈欣,符芳,李雪松,王伟,李曦,高学军. 2010

[8]青海省部分地区副猪嗜血杆菌流行病学研究. 逯忠新,高鹏程,贺英,储岳峰,赵萍,赵海燕,马利青,陆艳,蔡其刚. 2009

[9]副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析. 李建军,胡明明,朱晓凯,李艳玲,张艳禾,谢芳,王春来. 2012

[10]副猪嗜血杆菌菌影疫苗免疫效力评价. 胡明明,张艳禾,谢芳,李建军,朱晓凯,王春来. 2011

[11]副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的初步鉴定. 郑楠,符芳,柴政,姜福成,王香玲,张雪云,王卓,李曦. 2013

[12]复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌方法的建立及初步应用. 贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,逯忠新,赵海燕. 2009

[13]宁夏部分地区副猪嗜血杆菌病的血清学调查. 白刚,贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,张念章,冯小明,郭晗,樊祜卿,吴润,逯忠新. 2010

[14]副猪嗜血杆菌间接ELISA检测方法的建立. 刘双红,李大鹏,徐胜奎,谢芳,李刚,李婷,孙斌,王春来. 2016

[15]副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtB蛋白的表达及其免疫保护效力分析. 李大鹏,徐胜奎,刘双红,李刚,王春来. 2016

[16]副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用. 冯小明,储岳峰,贺英,高鹏程,赵萍,郭晗,樊祜卿,逯忠新. 2009

[17]副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析. 李艳玲,李建军,周泷,崔宁,刘娇,张艳禾,李刚,谢芳,王春来. 2013

[18]副猪嗜血杆菌检测技术研究进展. 马艳平,刘永生,张杰. 2009

[19]副猪嗜血杆菌自转运三聚体VtaA1蛋白的表达及其免疫保护效力研究. 刘娇,崔宁,周泷,牛慧,张艳禾,李刚,谢芳,唐月敏,倪宏波. 2014

[20]浙江省副猪嗜血杆菌分离株的生物学特性. 何海健,陆国林,熊永忠. 2010

作者其他论文 更多>>