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重组牛IFN-γ蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王睿男;蒋菲;刘亚涛;宋晓晖;刘永生;王文;储岳峰;曹小安;王传彬;孙雨

作者机构：

关键词： 重组牛IFN-γ蛋白;杆状病毒;真核表达;蛋白纯化;

期刊名称：中国草食动物科学

ISSN： 2095-3887

年卷期： 2021 年 41 卷 02 期

页码：

收录情况： 农林核心（2020版）

摘要： 为合成与天然构象相似的干扰素γ蛋白,通过优化干扰素序列的密码子序列,利用杆状病毒表达系统合成真核重组牛IFN-γ蛋白。实验化学合成牛IFN-γ基因,并将该基因克隆至真核表达载体pFastBacHTA中,将构建成功的重组载体与DH10Bac感受态大肠杆菌进行转座形成穿梭载体,穿梭载体质粒瞬时转染至SF9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒,最后利用SF9昆虫细胞悬浮培养大量表达目的蛋白。蛋白纯化后经Western Blotting和BOVIGAM牛分枝杆菌IFN-γELISA检测试剂盒检测分析,具有较好的免疫原性和反应原性。研究结果为牛IFN-γ的单克隆抗体制备以及牛结核病临床诊断奠定了基础。

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