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酶促反应结合灰度分析技术快速测定烟草及其制品中葡萄糖的含量

文献类型： 中文期刊

作者： 彭丽娟;何声宝;刘宇晨;袁源;卢钒;李苓;王春琼;张威

作者机构：

关键词： 烟草;葡萄糖;灰度值;酶促反应

期刊名称：理化检验-化学分册

ISSN： 1001-4020

年卷期： 2023 年 59 卷 1 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版）

摘要： 烟草样品溶液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的作用下，可使色原性氧受体4-氨基安替比林与酚定量缩合，生成红色醌类化合物，通过Image软件将溶液颜色转化为灰度值信号，从而确定样品中葡萄糖的含量。样品经干燥、研磨后，分取（0.1±0.000 1）g,加入20 mL水，于（30±0.5）℃振荡萃取30 min。用快速定性滤纸过滤，弃去初始滤液，收集后续的2～3 mL滤液备用。移取100μL上述滤液于装有R1和R2试剂各450μL的2 mL微量离心管中，混匀后置于（37±0.5）℃的恒温水浴摇床中反应5 min。利用智能手机对显色液拍照，通过Image软件将彩色图片转化为灰度模式，得到灰度值。以水为参比，对显色液灰度值进行归一化处理，得到灰度值比值。以葡萄糖浓度的对数为横坐标，灰度值比值为纵坐标绘制标准曲线。结果显示：标准曲线的线性范围为0.100～4.000 mmol·L-1,检出限（3s）为0.021 6 mmol·L-1;对相同浓度的葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖等9种糖类化合物标准溶液进行测定，除葡萄糖外，其余糖类显色液的灰度值与空白溶液无明显差别；对标准烤烟样品进行精密度和回收试验，测定值的相对标准偏差（n=6）均不大于4.0%,葡萄糖的加标回收率为98.3%～103%;方法用于实际样品分析，并与高效液相色谱法进行比对，结果表明在95%置信度下，两种方法测定结果无显著性差异。

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