Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒的构建及表达
文献类型: 中文期刊
作者: 张攀;张永光;王永录;潘丽;胡文发;唐华;方玉珍;蒋守田;吕建亮;周鹏;张中旺;刘新生
作者机构:
关键词: Asia 1型口蹄疫病毒;多抗原表位;BHK-21细胞;表达
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2013 年 08 期
页码: 771-775
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了构建Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒,采用多表位基因串联策略,合成包括口蹄疫病毒T细胞和B细胞表位基因的基因片段F,该基因片段由结构蛋白VP1上的2个B细胞表位(VP1135-159aa、VP1194-211aa)基因、非结构蛋白3A和3D上的T细胞表位(3A21-35aa、3D795-803aa)基因组成。利用限制性内切酶HindⅢ、XbaⅠ将基因片段F克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切鉴定、序列分析正确后,利用LipofectamineTM2000将阳性重组质粒pc-F转染至BHK-21细胞。Western-blot和IFA分析结果显示,所表达的蛋白大小约25.4ku,能够与Asia 1型口蹄疫病毒标准兔抗血清发生特异性反应,证实所表达的蛋白具有较好的反应原性。结果表明,Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒pc-F构建成功,且能在BHK-21细胞中正确表达。
分类号: S852.65
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