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表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 冯军科;朱远茂;任宪刚;祖立闯;李娇;史鸿飞;高欲燃;童光志;薛飞

作者机构：

关键词： 牛呼吸道合胞体病毒;G蛋白基因;牛疱疹病毒Ⅰ型;磷酸钙-DNA沉淀法

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 32 卷 02 期

页码： 81-85

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过反向蚀斑筛选,得到重组病毒BHV-1/TK-/G+。PCR检测结果证实G蛋白基因已经插入到了亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组中,间接免疫荧光试验和western blot证实BHV-1/TK-/G+中的G蛋白基因在感染的细胞中获得了表达。本研究为研制BRSV及其他重要牛传染病的BHV-1病毒活载体疫苗奠定了基础。

分类号： S852.65

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[1]牛呼吸道合胞体病毒G蛋白的截短表达与鉴定. 冯军科,薛飞,李娇,祖立闯,朱远茂,任宪刚. 2008

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