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豆状囊尾蚴烯醇酶在毕赤酵母中的高效表达及其功能分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张少华;骆学农;侯俊玲;郑亚东;尤亚南;才学鹏

作者机构：

关键词： 豆状囊尾蚴;烯醇酶;真核表达载体;多功能性;组织定位

期刊名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会第十四次全国学术会议暨第五次国际寄生虫学学术研讨会论文摘要集

ISSN：

年卷期： 2013 年

页码： 1

收录情况： CSCD

摘要： 烯醇酶作为一种多功能蛋白,与多种病原的致病性关系密切。本研究根据豆状囊尾蚴烯醇酶Tpeno基因序列及毕赤酵母密码子偏好性设计特异性引物,PCR扩增Tpeno编码基因,构建pPIC9K-Tpeno真核表达载体,电转化PichiapastorisGS115宿主菌;甲醇诱导表达后经SepharoseS300层析纯化,并进行SDS-PAGE和Westernblot分析。采用分光光度法检测磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)生成速率,测定Tpeno对底物的分解活性和与人纤溶酶原的结合活性;免疫组化及间接免疫荧光分析Tpeno的组织分布。结果表明:Tpeno在酵母中可高效稳定表达,纯化后的目的产物可达15.6...

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