猪生殖与呼吸综合征病毒的SYBRGreen-Ⅰ荧光定量PCR检测
文献类型: 中文期刊
作者: 王小武;符芳;许红喜;周艳君;童光志;李曦
作者机构:
关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒;SYBRGreen-Ⅰ;荧光定量PCR
期刊名称:中国兽医科学
ISSN:
年卷期: 2008 年 05 期
页码: 401-406
收录情况: CSCD
摘要: 根据猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白基因核酸序列设计引物,经BLAST比较发现,该引物既可以扩增较早发现的PRRSV毒株,也可以扩增近期发现的在Nsp2基因上有较大变异的PRRSV毒株,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为标准品建立了检测PRRSV的SYBRGreen-Ⅰ荧光定量PCR方法。结果表明,该方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可以达到1×101拷贝/μL,约为普通PCR的100倍;用该方法检测人工感染PRRSV的猪全血,结果阳性检出率为100%。敏感性、特异性和稳定性试验表明,该方法具有很高的敏感性、特异性和稳定性,可以用来快速检测PRRSV。
分类号:
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