一种用高拷贝质粒载体制备BAC载体基本功能基因的新方法
文献类型: 中文期刊
作者: 崔红玉;王亚萍;徐明举;薛永志;石星明;兰德松;王云峰;童光志
作者机构:
关键词: 细菌人工染色体(BAC);高拷贝质粒;BAC载体;单拷贝质粒
期刊名称:安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2008 年 36 卷 23 期
页码: 87-89+147
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: [目的]简便有效地解决BAC载体序列因单一拷贝数带来的制备以及下游亚克隆操作的困难。[方法]选择适当的单一酶切位点,将单拷贝BAC载体质粒序列全部插入高拷贝质粒pUC119载体的适当位点。[结果]BAC载体基本功能基因序列在新质粒pUC119-BAC中失去了单一拷贝数控制功能,以高拷贝形式进行复制,利用单一酶切,可将BAC载体基本功能基因序列完整切下来,自连后重新恢复严格的单拷贝控制功能。[结论]利用高拷贝pUC119-BAC质粒,实现了BAC载体的基本功能基因序列高拷贝的复制和扩增,可以方便地用于分子克隆化重组病毒转移载体的构建或BAC文库的构建。
分类号: Q782
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