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木聚糖酶XynB-E18的重组表达纯化及酶学性质测定

文献类型: 中文期刊

作者: 宋迎;鲁芳;严孝金;张蓓;刘永;张立;孟昆;杨培龙;姚斌;高伟

作者机构:

关键词: Xyn B-E18;重组表达;分离纯化;酶学特性

期刊名称:山东农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1000-2324

年卷期: 2018 年 2 期

页码: 320-325

收录情况: 北大核心(2020版) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)

摘要: 为了测定木聚糖酶Xyn B-E18的活性以及酶学特征,采用大肠杆菌原核表达系统对来源于青贮饲料菌群的木聚糖酶Xyn B-E18进行重组表达纯化。在16℃180 r·min-1条件下表达,并通过Ni亲和层析和分子排阻层析的方法进行纯化,用DNS显色法测定其酶学性质。得到的重组蛋白能在大肠杆菌中获得高效表达,纯化后的蛋白溶液纯度达90%以上,蛋白分子量约为38k Da,酶活力可达1782 U,最适反应p H为6.5,在中性偏碱性条件下酶的稳定性较好,最适反应温度为50℃,在50℃以下酶的热稳定性保持较好。实验结果表明Xyn B-E18具有良好的稳定性,可具有更大应用潜力。

分类号: Q55`Q78

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