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外源基因在转基因玉米中的整合位点分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王翠云;刘艳;刘允军

作者机构：

关键词： 转基因玉米;外源基因;整合位点;TAIL-PCR

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2019 年 3 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 玉米是我国第一大作物,在保障我国粮食安全中发挥重要作用.通过转基因技术培育具有抗病虫等性状的转基因玉米新品种,可有效减少产量损失.培育的转基因玉米需要鉴定外源基因整合位点,为转基因玉米的安全性评价提供重要依据.以一个抗虫转基因玉米事件IE34为材料,采用热不对称PCR(TAIL-PCR)和遗传定位方法,鉴定外源基因整合位点及旁侧序列.通过TAIL-PCR得到一段长度为776 bp的玉米基因组序列.分别在旁侧序列和外源基因上游序列设计特异性引物,建立了转基因玉米事件特异性的PCR鉴定方法.将旁侧序列在MaizeGDB中进行比对分析,发现此序列是重复序列而且存在于多条染色体上.构建转基因玉米IE34与自交系B73的F2代遗传分离群体,通过BSR-Seq方法确定外源基因整合在玉米第5染色体短臂2.32-2.70Mb区间内.通过精细定位将外源基因整合位点缩小在第5染色体2.35-2.61 Mb约260 kb的区间内.本研究结果表明,对于整合位点旁侧序列复杂的转基因事件,TAIL-PCR结合遗传定位方法能够有效鉴定外源基因的整合位点.

分类号： S513

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