蓝舌病病毒10质粒反向遗传操作系统的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 郭运泽;孙恩成;徐青元;步志高;吴东来;王凤龙
作者机构:
关键词: 蓝舌病病毒;反向遗传;质粒系统
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2019 年 3 期
页码: 234-238
摘要: 为建立蓝舌病病毒(BTV) 10质粒反向遗传操作系统,本研究将BTV16型BN96/16株10个基因节段分别克隆至pS111载体相应的酶切位点,构建10个重组质粒转染BSR细胞,拯救获得重组病毒,命名为rBTV-16.测序结果显示,拯救病毒rBTV-16与其亲本病毒wtBTV-16的核苷酸序列完全相同;经电镜观察,可见典型形态的环状病毒属病毒粒子;间接免疫荧光试验结果显示,rBTV-16能够感染细胞;病毒基因组检测结果显示,rBTV-16各个基因节段的长度与亲本病毒完全一致;病毒生长曲线的测定结果显示,rBTV-16与亲本病毒具有一致的复制特性.本研究建立的10质粒系统比传统体外转录拯救系统的操作过程简便,提高了拯救病毒的效率,为进一步深入研究BTV的致病机理奠定了基础.
分类号: S852.65
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