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猪肾上皮细胞(PK-15)酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 李晓月;王春来;倪宏波

作者机构：

关键词： PK-15;SMART技术;酵母双杂交cDNA文库

期刊名称：黑龙江八一农垦大学学报

ISSN： 1002-2090

年卷期： 2019 年 31 卷 5 期

页码： 40-45

摘要： 应用SMART技术构建猪肾上皮细胞(PK-15)酵母双杂交cDNA文库,为进一步筛选与副猪嗜血杆菌(HPS)细胞致死膨胀毒素(CDT)不同亚基蛋白相互作用蛋白奠定基础.提取PK-15的总RNA,经LD-PCR合成双链cDNA,运用SMART技术,再通过同源重组的方法,构建了PK-15细胞的酵母cDNA文库.经检测,文库滴度达到了2.8x108 CFU· mL-1,插入的双链cDNA片段范围为300~1 000 bp,片段平均大小为500 bp.此文库可用于筛选与HPS CDT不同亚基蛋白相互作用的蛋白,这将为治疗靶点的选择、基因缺失弱毒活疫苗的设计提供科学依据.

分类号： S855.1

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