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牛星状病毒及牛环曲病毒双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王文佳;邓廷贤;赵丽;师志海

作者机构：

关键词： 牛星状病毒;牛环曲病毒;犊牛腹泻;双重RT-PCR

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 NULL 卷 7 期

页码： 840-844

摘要： 为建立能同时快速检测牛星状病毒(bovine astrovirus,BAstV)和牛环曲病毒(bovine torovirus,BToV)的方法,本研究根据BAstV的ORF1a和BToV的S基因的保守区域分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测BAstV和BToV的双重RT-PCR方法.特异性结果显示,该方法与牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRo V)、牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKoV)无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对BAstV和BToV质粒标准品的最低检出下限分别为1.12*10~4copies/μL和1.0*10~3copies/μL.应用该方法和各病原RT-PCR方法同时对221份河南省犊牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示BAstV的阳性率为18.1%,BToV的阳性率为19%,其中BAstV和BToV共感染的阳性率为6.79%,双重RT-PCR方法和各病原RT-PCR方法的符合率为100%.结果表明,本研究建立的双重RT-PCR方法可用于BAstV和BToV的病原监测及流行病学调查.

分类号： S852.653

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