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鸽源新城疫病毒F基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 贺泂杰;时永杰

作者机构：

关键词： 鸽;新城疫病毒;F基因;克隆;原核表达

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 07 期

页码： 742-746

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法扩增了鸽源新城疫病毒F基因并将其克隆至pMD18-T载体,测定其核苷酸序列。根据F基因CDS序列,设计原核表达引物,扩增F基因功能区片段,并构建了重组原核表达质粒pGEX4T-1-NDV F(924),在不同时间和温度下进行诱导表达。通过SDS-PAGE检测,目的基因表达出约60ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,表达目的蛋白的最佳诱导时间为6h,最佳诱导温度为42℃;提取并纯化包涵体蛋白,用其免疫BALB/c小鼠,采小鼠血进行ELISA检测。结果显示,表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。上述结果表明,缺失疏水区的F基因可以在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,表达的重组F蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。

分类号： S852.65

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