高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒基因缺失标记疫苗ELISA鉴别诊断方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 孙晶;周艳君;姜一峰;徐彦召;童武;童光志
作者机构:
关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒;多肽抗原;25aa-ELISA
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2014 年 01 期
页码: 30-36
摘要: 为了配合(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)基因标记疫苗株(rHN4-Δ25+NP49株)的临床抗体鉴别诊断应用,本研究以标记疫苗中缺失的25个氨基酸多肽作为包被抗原,通过对ELISA反应条件的优化,确定抗原最适包被浓度为500 ng/孔,血清最佳稀释度为1:40,同时确定其阴阳性临界值S/P判定标准为0.15,批内和批间重复实验结果显示其变异系数均低于10%,表明该方法具有良好的重复性。对临床血清检测结果显示与IDEXX试剂盒检测结果的符合率为94.84%,采用25 aa负标记ELISA方法检测HuN4-F112免疫猪血清,结果显示从免疫后21 d可检测25 aa特异性抗体,该抗体至少可持续存在126 d。本研究建立的ELISA检测方法为今后PRRSV基因工程标记弱毒疫苗株在临床鉴别诊断的应用提供了有利保障。
分类号: S852.659.6
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