数字农科院2.0

猪生殖与呼吸综合征病毒的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR检测

文献类型： 中文期刊

作者： 王小武;符芳;许红喜;周艳君;童光志;李曦

作者机构：

关键词： 猪生殖与呼吸综合征病毒;SYBRGreen-Ⅰ;荧光定量PCR

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 38 卷 05 期

页码： 401-406

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白基因核酸序列设计引物,经BLAST比较发现,该引物既可以扩增较早发现的PRRSV毒株,也可以扩增近期发现的在Nsp2基因上有较大变异的PRRSV毒株,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为标准品建立了检测PRRSV的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR方法。结果表明,该方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可以达到1×101拷贝/μL,约为普通PCR的100倍;用该方法检测人工感染PRRSV的猪全血,结果阳性检出率为100%。敏感性、特异性和稳定性试验表明,该方法具有很高的敏感性、特异性和稳定性,可以用来快速检测PRRSV。

分类号： S854.43

  • 相关文献

[1]猪生殖与呼吸综合征病毒的SYBRGreen-Ⅰ荧光定量PCR检测. 王小武,符芳,许红喜,周艳君,童光志,李曦. 2008

[2]PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR GreenⅠ实时荧光PCR鉴别方法的建立. 柴政,李曦,王小武,符芳,张永欣,肖晶,蔡雪辉,周艳君,宋淑萍. 2009

[3]高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒感染猪外周血单核细胞cDNA文库的构建. 肖晶,符芳,李海忠,张永欣,柴政,蔡雪辉,宋淑萍,李曦. 2009

[4]猪圆环病毒2型和猪生殖与呼吸综合征病毒混合感染的检测. 蔡承如,尚佑军,蔺芳,田宏,尹双辉,吴锦艳,杨顺利,刘湘涛. 2009

[5]PRRSV和PCV-2以及PRV多重SYBRGreen-Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立. 王小武,符芳,柴政,孔令达,蔡雪辉,宋淑萍,许红喜,李曦. 2008

[6]PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用. 谭斌,刘长明,危艳武,张超范,刘永刚,冉多良. 2006

[7]PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建. 赵娜,田宏,吴锦艳,祁燕蓉,满自萍,尚佑军,何生虎,刘湘涛. 2009

[8]PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR鉴别方法的建立. 柴政,李曦,王小武,符芳,张永欣,肖晶,蔡雪辉,周艳君,宋淑萍. 2009

[9]宁夏地区猪生殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及其变异分析. 满自萍,田宏,吴锦艳,赵娜,尚佑军,刘湘涛,杨春生,何生虎. 2009

[10]PCV2PPVPRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用. 岳丰雄,崔尚金,冉多良,张超范. 2008

[11]PRRSVGP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定. 田野,张维军,林燕,王群,杨涛,步志高,童光志,张守发,吴东来. 2009

[12]截短的猪生殖与呼吸综合征病毒M基因的原核表达. 戚亭,崔尚金,张超范. 2008

[13]PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBRGreenⅠ实时荧光PCR鉴别方法的建立. 柴政,李曦,王小武,符芳,张永欣,肖晶,蔡雪辉,周艳君,宋淑萍. 2009

[14]猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化. 胡涛,才学鹏. 2006

[15]猪生殖与呼吸综合征病毒NM1株的分离鉴定及其Nsp2基因的序列分析. 李真光,冷雪,齐巧玲,温永俊,武华. 2009

[16]猪生殖与呼吸综合征病毒HN/XT/07株的分离鉴定及其Nsp2基因的特性分析. 吴锦艳,田宏,尚佑军,郑海学,靳野. 2008

[17]PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定. 田野,张雏军,林燕,王群,杨涛,步志高,童光志,张守发,吴东来. 2009

[18]PRRSV和PCV-2以及PRV多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立. 王小武,符芳,柴政,孔令达,蔡雪辉,宋淑萍,许红喜,李曦. 2008

[19]猪生殖与呼吸综合征病毒CH-1a株GP5蛋白基因的表达及其单克隆抗体的制备. 周艳君,安同庆,薛强,仇华吉,童光志,刘金霞,田志军,王云峰,彭金美. 2005

[20]金丝桃素体外抗高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒活性的研究. 蒲秀英,梁剑平,许涛,尚若峰,王学红,华兰英,刘宇,邢妍美. 2008

作者其他论文 更多>>