数字农科院2.0

应用双重实时荧光定量PCR方法检测鸡马立克氏病血清1型病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 张颖;刘长军;秦运安;张艳萍;张晓巍;郝永清

作者机构：

关键词： 实时荧光定量PCR;马立克氏病病毒;Meq基因;卵铁转蛋白基因

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2007 年 29 卷 01 期

页码： 46-51

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究建立了鸡马立克氏病血清1型病毒(MDV1)绝对定量检测方法。研究中选择MDV1特有的Meq基因的一段保守序列作为检测对象,将其克隆到质粒载体中,作为阳性标准品;同时将管家基因-鸡卵铁转蛋白(Ovo)特异性基因片段克隆到质粒载体上作为内参照的标准品。经荧光定量PCR(FQ-PCR)法扩增获得MDV1的FQ-PCR两条标准曲线,建立了MDV1双重FQ-PCR检测方法。应用该方法绝对定量检测了实验攻毒鸡及吉林省某地发病鸡只的羽髓、淋巴细胞等组织样本中单位细胞病毒拷贝数,并与琼脂扩散(AGP)、常规PCR等检测方法进行比较。结果表明,不论实验攻毒鸡还是自然发病鸡,羽髓中病毒富含量均高于其它组织,每百万宿主细胞内病毒含量为107～108拷贝;FQ-PCR检测MD发病鸡只的阳性率高于AGP,达100%;该方法的灵敏度比常规PCR检测高10～100倍,在单位细胞内可灵敏地检测到2.78个拷贝的病毒。该方法可以在不同的样品中有效的绝对定量检测MDV1。

分类号： S854.43

  • 相关文献

[1]鸡马立克氏病病毒HC135分离株的致病性. 张艳萍,刘长军. 2011

[2]4株鸡马立克氏病病毒国内分离株Meq基因的克隆与序列分析. 施维松,刘长军,张艳萍,秦运安,张晓巍,李晶梅,陈洪岩. 2008

[3]一株鸡马立克氏病毒的分离鉴定及其主要致病基因分析. 张艳萍,刘长军,施维松,秦运安,张晓巍,李晶梅. 2008

[4]9株鸡马立克氏病毒野毒株在鸭胚成纤维细胞上的培育及鉴定. 张艳萍,刘长军,李晶梅,刘爱玲,施维松,闫福海,秦运安. 2008

[5]兰州市部分地区鸡马立克病流行病学调查. 艾文娜,吴润,刁小龙,李叙涟,何轶群,管宏伟,罗鹏. 2013

[6]鸡马立克氏病强弱病毒株PCR鉴别检测方法在诊断中的应用评价. 吕红超,张艳萍,孙国荣,高玉龙,李志杰,郑惠文,包珂岩,王笑梅,刘长军. 2016

[7]鸡马立克病毒HC135分离株的致病性研究. 张艳萍,刘长军. 2010

[8]马立克氏病病毒meq基因缺失株细菌人工染色体序列自我敲除的分子鉴定. 孙鹏,苏帅,李延鹏,丁家波,崔治中. 2015

[9]利用CRISPR/Cas9技术缺失MDV分离株meq基因的研究. 张峰,于正浩,兰兴鸽,张艳萍,王永强,高立,高玉龙,李凯,祁小乐,崔红玉,潘青,王笑梅,刘长军. 2019

[10]HVT和MDV在不同MD抗性鸡羽髓中相互作用的研究. 蔡文博,牛成明,韩凌霞. 2010

[11]马立克氏病病毒Ribozyme基因的合成克隆和表达质粒的构建. 杨子平,谢庆阁. 1992

[12]马立克氏病病毒miRNA缺失株的构建及其体外生长规律. 杨文闯,刘长军,张艳萍,李志杰,张锋,侯广玉,丛锋. 2011

[13]禽用基因工程疫苗的研究现状及应用前景. 童光志. 2002

[14]鸡马立克氏病病毒流行毒株高代次细胞毒株Meq、RLORF4、RLORF12及132bpr基因变异分析. 刘爱玲,刘长军,张艳萍,李晶梅,施维松. 2009

[15]热休克蛋白gp96的免疫作用概述. 邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵,周斌,沈阳,马志永,陈溥言. 2009

[16]马立克氏病病毒感染鸡羽髓上皮细胞差异蛋白质组学研究. 丛锋,刘长军,张艳萍,李志杰,张锋,成云,杨文闯,许娜娜. 2011

[17]马立克氏病病毒meq基因敲除株感染性克隆的免疫效果评价. 李延鹏,康孟佼,苏帅,丁家波,崔治中,朱鸿飞. 2010

[18]区分马立克氏病病毒疫苗株CVI988与其他毒株的PCR方法的建立及应用. 丁家波,姜世金,朱鸿飞,崔治中. 2007

[19]MDV-1VP22增强鸡传染性法氏囊病病毒VP2DNA免疫作用. 陈鸿军,张晨飞,宋翠萍,邓绪芳,秦爱建. 2008

[20]缺失部分miRNA的重组马立克氏病病毒致病性研究. 杨文闯,刘长军,刘芳萍,赵洪海. 2011

作者其他论文 更多>>