日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区cDNA片段的克隆表达及其免疫保护功能
文献类型: 中文期刊
作者: 朱建国;林矫矫;冯新港;陈永军;吴祥甫;周元聪;蔡幼民
作者机构:
关键词: 日本血吸虫;抱雌沟蛋白;保守区编码基因;克隆表达
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2001 年 23 卷 05 期
页码:
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白 (Gynecophoralcanalprotein)基因SmGCP保安区片段设计一对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用TR_PCR法扩增出一大小为 86 8bp的基因片段。测序后分析序列推断该片段与SmGCP相应片段碱基同源性 86 .6 % ,说明所克隆的基因为编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因 ,推断的氨基酸序列同源性为84.1%。将其克隆到表达载体pET2 8(a)中 ,在大肠杆菌BL2 1中获得了较高量的融合表达 ,表达产物分子量约 2 9kD。利用日本血吸虫成虫粗抗原免疫大白兔所得抗血清对该表达产物进行Westernblot检测 ,在预测位置出现了明显的识别条带 ,显示了该表达产物良好的抗原性。将该表达产物用佐剂处理免疫昆明系小鼠 ,攻击血吸虫尾蚴 ,7周后剖杀小鼠冲虫 ,进行成虫和虫卵计数 ,其减虫率为 35 .2 % ,减卵率为 37.8% ,与对照组比较差异显著 ,初步证明血吸虫抱雌沟蛋白具有一定的免疫保护功能。
分类号: S852.735
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