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禽网状内皮增生症病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 石星明;张晶;赵妍;王玫;魏秀英;胡顺磊;全炎铭;闫帅;崔红玉;王云峰

作者机构：

关键词： 禽网状内皮增生症病毒;gp90基因;单克隆抗体

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 09 期

页码： 1289-1294

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得分泌抗禽网状内皮增生症病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,通过表达pET32a-gp90重组蛋白,以纯化的gp90蛋白为抗原,免疫BALB/c鼠,筛选分泌抗REV McAb的杂交瘤细胞株。经过细胞的融合及筛选,共获得能稳定分泌抗REV gp90的McAb细胞系2株,分别命名为A9E8和B3F8。2株细胞培养上清的效价均在1∶4×102以上,腹水效价均在1∶8×103以上。亚型鉴定结果表明,2株皆为IgG型,轻链均为κ链;Western blot及间接免疫荧光结果显示,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能识别REV全病毒抗原,与其发生特异性反应,并且不与禽类其他病毒发生反应;病毒中和试验结果表明,获得的单克隆抗体均能REV临床分离株发生中和反应,具有较好的中和活性。利用制备的单克隆抗体建立了REV的间接免疫荧光检测方法,临床病料检测结果表明,该方法与病毒分离及PCR的检测结果基本一致,阴、阳性符合率分别为100%和90%。作者制备了针对REV gp90的McAb,为REV的快速诊断及抗原表位分析与鉴定等奠定了基础。

分类号： S852.659.3

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