数字农科院2.0

A型口蹄疫病毒多基因重组腺病毒载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 孙普;卢曾军;刘霞;李平花;白兴文;郭建宏;包慧芳;刘在新

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;腺病毒载体;体外连接

期刊名称：甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2008 年 43 卷 04 期

页码： 17-22

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用体外连接法构建了含有A型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A和3C或3ABC基因的重组腺病毒表达载体.利用PCR技术分别扩增得到P1-2A、3C和3ABC基因,经XbaⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/KpnⅠ双酶切之后,与XbaⅠ/KpnⅠ双酶切的穿梭载体pShuttle2大片段连接,获得重组穿梭质粒pSh-P12a3c和pSh-P12a3abc.然后用I-CeuⅠ和PI-SceⅠ双酶切穿梭质粒回收目的基因表达盒,通过体外连接法将目的基因表达盒与BD Adeno-X Vi-rus DNA连接,转化DH5α感受态菌.获得两个重组腺病毒质粒分别命名为A-P12a3c和A-P12a3abc,经PCR、酶切及测序鉴定正确.用PacⅠ酶切后转染HEK293细胞,取转染细胞裂解液上清连续传至第5代时,在24~48 h内细胞完全病变.分别提取第3、7代病毒DNA,可扩增出目的基因,表明目的基因已整合到腺病毒基因组内,且能稳定传代.

分类号： S852.5

  • 相关文献

[1]FMDV全ORF编码基因的克隆及其腺病毒载体的构建. 高鹏,李志勇,柳纪省. 2014

[2]腺病毒在动物口蹄疫防治中的研究进展. 王猛,刘永生,张杰. 2010

[3]腺病毒载体及其在口蹄疫疫苗研究中的应用. 孙普,卢曾军,刘在新. 2007

[4]H5N1禽流感病毒NA基因重组腺病毒表达载体的构建. 王青,胡建和,徐彦召,朱国坡,宋涛,李任峰. 2010

[5]禽源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒载体的构建与鉴定. 周继章,邱昌庆,张小英,曹小安. 2006

[6]H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建. 王青,胡建和,徐彦召,朱国坡,郑素玲. 2010

[7]腺病毒载体在基因治疗和疫苗研究中的应用. 卢曾军,曹轶梅,刘在新,谢庆阁. 2006

[8]腺病毒载体在基因治疗和疫苗研究中的应用. 卢曾军,曹轶梅,刘在新,谢庆阁. 2006

[9]腺病毒载体流感疫苗研究进展. 吴运谱,张晓华,乔传玲. 2012

[10]腺病毒载体转染水牛不同原代体细胞的效果比较. 段安琴,庞春英,朱鹏,陆杏蓉,邓廷贤,梁贤威. 2016

[11]猪流行性腹泻病毒中和抗体PC10-IgG重组腺病毒的构建及其抗病毒效果的研究. 罗毅,符芳,李亮,尹灵丹,郭珊珊,薛美,孙元,单玲玲,李忍,刘翔,冯力,刘平黄. 2020

[12]腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究. 王震,陈运通,魏天悦,陈洪岩,王旭光,高玉龙,夏长友,孟庆文. 2024

[13]不同储存条件和反复冻融次数对口蹄疫病毒滴度的影响. 孔洁,李亭玉,李太元,常惠芸. 2019

[14]三种大肠杆菌表达的口蹄疫病毒A型多表位蛋白对猪的免疫原性比较. 曹轶梅,王兴凯,王省,李坤,付元芳,李冬,卢曾军,刘在新. 2019

[15]猪源DDX56对口蹄疫病毒的复制及其对病毒诱导的RLR通路调节的研究. 付绍祖,李露露,张敬,李丹,郑海学. 2019

[16]塞尼卡病毒与口蹄疫病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立. 刘涛,黄元,陈锦良,向华,肖少波,王晓虎,陈晶,向蓉,何继军,郑海学. 2019

[17]口蹄疫病毒结构蛋白VP1容忍外源标签的能力. 李平花,马雪青,寻广谨,白兴文,孙普,袁红,卢曾军,刘在新. 2017

[18]关于英国口蹄疫暴发污染;给全球疫苗研究、生产机构发出的重要警示——生物安全控制的“弦”必须绷紧. 宋立荣. 2008

[19]O型口蹄疫病毒基因重组腺病毒动物免疫试验. 卢曾军,曹轶梅,刘在新,谢庆阁. 2006

[20]搭载飞船的口蹄疫病毒株O／Akesu／58的变异研究. 刘庆军,张永光,王永录,方玉珍,蒋守田,张维德,潘丽,王炜,孙元. 2006

作者其他论文 更多>>