日本血吸虫SjIM基因克隆表达及动物免疫保护评估
文献类型: 中文期刊
作者: 吕立婷;洪炀;彭金彪;张娟;付志强;林矫矫
作者机构:
关键词: 日本血吸虫;肌醇单磷酸酶;克隆;免疫保护
期刊名称:中国血吸虫病防治杂志
ISSN: 1005-6661
年卷期: 2012 年 04 期
页码: 428-434
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的克隆并表达日本血吸虫肌醇单磷酸酶(SjIM)编码基因cDNA,评估该重组抗原抗血吸虫感染的免疫保护效果。方法以日本血吸虫42 d虫体cDNA为模板,经PCR扩增编码SjIM蛋白的开放阅读框(ORF)基因片段。采用荧光实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫的表达情况。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,经异丙基βD硫代吡喃半乳糖苷诱导,制备重组SjIM蛋白。Western blotting检测重组蛋白的抗原性与免疫原性,利用重组SjIM抗原免疫小鼠评估其免疫保护效果。结果获得了编码SjIM基因ORF的cDNA片段,ORF长度为834 bp,编码278个氨基酸。荧光实时定量PCR显示该基因在35 d虫体中表达量最高。获得了SjIM重组蛋白,其具有良好的免疫原性。免疫组小鼠获得48.76%的减虫率和41.29%的肝脏减卵率。结论获得了日本血吸虫SjIM基因ORF的cDNA序列,并制备了重组SjIM蛋白,该重组抗原在小鼠体内能诱导产生部分抗血吸虫感染的免疫保护效果。
分类号: R383.24
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