文献类型： 中文期刊
作者： 孙佳卉;刘志艺;黄聪;李传峰;刘光清;陈宗艳
作者机构：
关键词： 鹅星状病毒;Cap蛋白;原核表达;单克隆抗体
期刊名称：中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2021 年 29.0 卷 1.0 期
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）
摘要： 自2016年以来,鹅星状病毒(GoAstV)已成为当前危害鹅养殖业生产的重要病原体之一,雏鹅均易感,主要引起9～19日龄雏鹅死亡,以雏鹅腿关节肿胀及肾脏尿酸盐沉积导致肾炎为主要病征.建立相应的病原学与血清学检测方法对于防控该病至关重要.为建立基于病毒Cap蛋白的诊断技术,本研究构建了鹅星状病毒去核定位信号肽的Cap基因原核表达质粒pET-30a-Cap,转化BL21(DE3)后用IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot检测Cap蛋白的表达.大量表达并纯化重组蛋白后,将其免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA检测免疫小鼠抗体效价,制备单克隆抗体,并对其进行鉴定.结果显示:获得的重组蛋白分子量约为28 kDa;通过3次亚克隆筛选最终获得5株杂交瘤细胞株1A5G10、1C11B11、5B7G8、9A12B12、9C3E11,抗体效价均可达1:51～200以上;1A5G10、5B7G8、9C3E11重链为IgG1型,1C11B11、9A12B12重链为IgG2b型,轻链均为κ型;制备的单克隆抗体均可与重组蛋白反应或GoAstV发生反应;其中5B7G8株与GoAstV发生反应,1C11B11、9A12B12株与GoAstV发生反应.本研究结果为GoAstV诊断方法的建立以及GoAstV Cap蛋白功能的进一步研究奠定了坚实基础.
分类号：
- 相关文献
[1]鹅源星状病毒ORF2基因原核表达及遗传进化分析. 蒲路莎,苏世博,陈肖韩,赵丽丽,陈洪岩. 2020
[2]Ⅱ型猪圆环病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定. 李海忠,符芳,张永欣,李曦,宋淑萍. 2010
[3]猪圆环病毒2型去核定位信号ORF2基因的原核表达与初步应用. 苗丽娟,符芳,王小武,陈微晶,鲁晶红,李曦. 2008
[4]流感病毒聚合酶PB1-1蛋白的表达与单克隆抗体的制备. 葛叶,邓国华,李雪平,陈化兰. 2009
[5]口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定. 田美娜,李永亮,卢曾军,付元芳,袁明,刘湘涛,刘在新. 2009
[6]鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ基因原核表达和单克隆抗体的制备及鉴定. 周长良,张雅春,王伟,李越,赵颖慧,臧凤霞,冉多良,孟庆文,陈洪岩. 2014
[7]猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及其单克隆抗体的制备. 侯强,彭伍平,孙元,仇华吉. 2008
[8]小麦高分子量谷蛋白亚基专一性单克隆抗体的制备及其抗原决定簇的研究. 王汉潜,张学勇,王红梅,庞斌双. 2004
[9]马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 李巧玲,崔红玉,牛军伟,闫帅,高明. 2013
[10]鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2)单克隆抗体制备和鉴定. 高俊娜,连雪,孙海伟,李泽君,张训海,JUNG Yong-Sam,陈鸿军,钱莺娟. 2016
[11]蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备. 耿宏伟,杨涛,马健男,孙恩成,王凌凤,魏鹏,秦永丽,吴东来. 2010
[12]抗山羊IgMμ链单克隆抗体的制备及鉴定. 蒙学莲,朱学亮,窦永喜,张志东. 2018
[13]伪狂犬病病毒gE基因的表达及gE蛋白单克隆抗体的制备. 王淑杰,蔡雪辉,刘永刚,吴国军,刘狄萩,张琦,马平,李成君,石文达. 2007
[14]马-干扰素成熟蛋白基因在大肠埃希氏菌中表达及其单克隆抗体的制备和特性鉴定. 白宇,童铁钢,刘光亮,肖一红,王群,徐树兰,张维军,吴东来. 2007
[15]蓝舌病病毒17型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定. 王凌凤,杨涛,孙恩成,耿宏伟,秦永丽,赵晶,蔡绪禹,刘霓红,李文京,吴东来. 2011
[16]鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备. 臧凤霞,张雅春,王伟,赵颖慧,李越,周长良,陈洪岩,孟庆文. 2014
[17]绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因表面蛋白的表达及其单克隆抗体的制备. 刘霄卉,斯日古楞,罗军荣,周建华,马学恩. 2008
[18]新城疫病毒ClassⅠ强毒株L基因的表达及单克隆抗体的制备. 韦娜娜,于洋,陈鸿军,仇旭升,于圣青. 2012
[19]IBDV血清Ⅱ型VP5蛋白原核表达及型特异性单克隆抗体的制备. 秦立廷,祁小乐,高宏雷,高玉龙,王笑梅. 2009
[20]结核分枝杆菌rv3295基因的原核表达及单克隆抗体的制备. 崔莹莹,宋宁宁,党光辉,曹俊,李华芳. 2015
作者其他论文 更多>>
-
番茄潜叶蛾天敌间的集团内捕食研究进展
作者：徐梦;王卫峰;卢燕回;黄聪;张桂芬;刘双清;张亚;张毅波
关键词：番茄潜叶蛾;集团内捕食;生物防治;捕食性天敌;寄生性天敌
-
犬干扰素α1的原核表达与抗病毒活性分析
作者：樊益铭;程松;张子晨;毕庄莉;张淼;周婷;胡名星;罗健;杜庆庆;朱英奇;刘光清
关键词：犬干扰素α1;原核表达;干扰素刺激基因(ISGs);抗病毒活性
-
Performance and functional responses of the thelytokous and arrhenotokous strains of Neochrysocharis formosa to Tuta absoluta, a globally severe tomato pest
作者：张桂芬;王浩;张毅波;冼晓青;黄聪;刘万学;万方浩
关键词：tomato leafminer; Eulophidae; Gelechiidae; idiobiont endo-parasitoid; choice experiment; biological control
-
重大外来入侵害虫番茄潜叶蛾抗药性及其机制研究进展
作者：冯科力;李寒;曹梦宇;张静航;薛延韬;罗明磊;李艳;马东方;帕提玛·乌木尔汗;黄聪;张桂芬;张毅波
关键词：番茄潜叶蛾;化学防治;田间防效;抗药性;抗性机制
-
猫传染性腹膜炎及其疫苗研究进展
作者：刘光清
关键词：猫传染性腹膜炎;冠状病毒;猫传染性腹膜炎病毒;疫苗
-
猫杯状病毒NS2蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备与应用
作者：董宁宁;张琦;谈晓梅;李娜;朱雯琪;刘光清;孟春春
关键词：猫杯状病毒;NS2蛋白截短;原核表达;多克隆抗体
-
1株犬疱疹病毒的分离与鉴定
作者：张子晨;蔡霖颖;樊益铭;唐净杰;杜庆庆;朱英奇;王桂军;刘光清
关键词：犬疱疹病毒;分离;鉴定;gD基因