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实时荧光LAMP法快速检测转基因猪的外源基因hLEA29Y

文献类型： 中文期刊

作者： 李津;苗健;刘巍;李刚;赵忠鹏

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增(LAMP);实时荧光;检测;外源基因;转基因猪

期刊名称：中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 转基因猪的研究涉及到人类医学、农业科学和动物科学等方面，外源基因成分的检测与人类健康和安全密切相关，迫切需要建立快速、简便、特异性高的检测方法，以满足现场检测的需求。在本研究中，我们采用了实时荧光LAMP法检测转基因猪的外源基因。针对hLEA29Y基因设计5条特异性引物，在64℃条件下，检测时间在30 min以内完成核酸扩增。通过实时荧光监测仪监测LAMP扩增中SYBR Green I染料在紫外荧光下激发的荧光信号强度，作为hLEA29Y基因扩增的判定依据。该方法灵敏度高，最小可检测低至4.7×102个拷贝，建立的实时荧光LAMP法检测转基因猪外源基因hLEA29Y的灵敏度是常规PCR检测方法的10倍；并且特异性好，与转基因猪中的外源基因hCD46、hCD39均无交叉反应；检测转基因猪的心、肝、脾、肺、肾及口腔拭子样本，检测结果显示样本中均可检测出转基因成分。研究建立的实时荧光LAMP法检测转基因猪的hLEA29Y基因，操作简单，反应快速，灵敏度高，特异性好，并且可以对猪活体进行无损伤采样检测，适合在现场快速简便的操作。

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